小鼠BMDM分离过程中"X颗粒"的鉴定及其对心肌细胞的促增殖作用
Identification of"X particles"during the isolation of BMDM from mice and their protective effects on myocardial cells
摘要目的 探讨小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage,BMDM)分离过程中"X颗粒"的来源并明确其对BMDM和心肌细胞的影响.方法 ①光学显微镜、扫描电镜、透射电镜观察"X颗粒"的大小、形态及结构;②qRT-PCR检测"X颗粒"中基因 16S和Rn18s的表达量以及"X颗粒"对BMDM极化相关基因(Cd80、Cd86、Il12、iNOS、Mrc1、Cd163、Arg1、Il10)表达量的影响;③转录组测序分别检测"X颗粒"中mRNA的成分和"X颗粒"对BMDM基因表达谱的影响;④CCK8实验检测"X颗粒"对心肌细胞系HL-1增殖的影响.结果 小鼠BMDM体外诱导培养第三天出现大量"X颗粒";"X颗粒"的直径约为 5 μm,根据形态和内容物可分为无核的红细胞(少量)和无核且富含溶酶体的类细胞(大量);在所有骨髓来源细胞中,"X颗粒"与中性粒细胞、巨核细胞、单核细胞在基因表达谱上最为相似;"X颗粒"促进BMDM保持更强的未极化(M0)特性(P<0.05);"X颗粒"促进心肌细胞的增殖(P<0.01).结论 "X颗粒"是在BMDM诱导过程中发现的生物颗粒(直径≈5 μm),具有较强的折光特性,主要包括红细胞和富含溶酶体的类细胞(无核)两种类型;"X颗粒"最有可能是来源于中性粒细胞、巨核细胞和单核细胞等骨髓来源细胞的碎片;其能够使BMDM保持未极化的状态,且"X颗粒"的存在能促进心肌细胞HL-1的增殖.
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