换一批
换一批Mx基因稀有密码子和mRNA结构及大肠杆菌表达优化
Optimizing the expression of Mx gene in Escherichia coil based on rare codon and mRNA structure
摘要通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构的分析,构建了4种重组表达菌株BL21(DE3)/pET-Mx,Rosseta(DE3)/pET-Mx,BL21(DE3)/pGEX-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx,在大肠杆菌中进行Mx基因的表达,Rosseta(DE3)/pET-Mx和Rosseta(DE3),pGEX-Mx重组表达菌中都获得了表达,Western blotting检测到了特异的75 kDa表达产物.实验结果证明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对Mx蛋白表达都有影响,选择适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)有利于Mx蛋白的表达,同时翻译起始区二级结构能值较低的表达载体pGEX-Mx获得的表达量明显增高.实验中首次获得了重组表达鸡全长Mx蛋白的大肠杆菌重组菌.
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分类号
R3
栏目名称
DOI
10.3724/SP.J.1005.2009.00075
发布时间
2009-03-31
基金项目
北京市自然科学基金（5051004）；
国家高技术研究发展计划(863计划)（2007AA102183）
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