獐茅HAK 基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析
Isolation of the promoter region of HAK gene from Aeluropus littoralis and functional analysis in rice
摘要獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis (Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用.为了进一步了解AlHAK1 基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1 基因转录起始位点上游长度约1.3 kb 的启动子区域.启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA 和CAAT 盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件.为了明确AlHAK1 启动子的功能,将其与GUS 基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301 上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中.对转基因植株进行GUS 组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1 启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS 活性.GUS 荧光定量分析显示AlHAK1 启动子调节GUS 表达活性低于组成型启动子CaMV35S 和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS 活性相对较高.对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS 活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE 元件和-1 268 bp 的MybBS 元件可能在高温、ABA 和干旱诱导的表达调控中起作用.
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