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烟草拟茎点霉快速检测方法的建立

A rapid detection method for Phomopsis sp. in tobacco

摘要为实现烟草拟茎点霉的快速准确检测,利用真菌rDNA-ITS通用引物对拟茎点霉和其他10种烟草病原菌基因组DNA进行了PCR扩增、片段回收及DNA测序,在序列比对基础上设计了两对特异性检测引物,并鉴定了引物的检测灵敏度和特异性,同时优化建立了PCR反应体系.结果表明,在退火温度为60℃时,两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R从烟草拟茎点霉DNA样本中分别扩增出来420 bp和381 bp的特异性条带,而在其他10种烟草病原菌DNA以及阴性对照中均不能扩增到任何条带.两对特异性引物的检测灵敏度均达到10 pg/μL.建立的基于两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R的分子检测方法可实现对病原菌烟草拟茎点霉的快速准确检测.

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作者 邢国珍 [1] 孙帅 [1] 李旭 [1] 邱睿 [2] 程琨 [1] 李博 [1] 陈佳敏 [1] 何雷 [3] 李淑君 [2] 郑文明 [1] 学术成果认领
作者单位 河南农业大学生命科学学院,郑州市金水区农业路63号 450002 [1] 河南省农业科学院烟草研究所 黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室,河南省许昌市魏都区永昌大道与青梅路交叉口 461000 [2] 中国烟草总公司河南省公司,郑州市金水区商务外环15号 450018 [3]
分类号 S435.72
栏目名称
发布时间 2023-02-24
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烟草科技

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