摘要巴斯德毕赤氏酵母表达系统已被广泛用于生产外源蛋白的寄主菌。利用该系统将外源基因整合交换到染色体上时,AOX1基因被破坏,使表达菌的甲醇利用缓慢,给发酵生产造成一定影响。在不改变现有表达系统前提下,从AOX1功能缺陷菌株分离出Mut+自发突变体。通过突变体在甲醇培养基中生长曲线的测定,HSA表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,证明突变体的甲醇利用能力和蛋白表达比原始菌株大大提高;突变体AOX2基因上游区域经PCR扩增进行全序列测定,结果表明在PAOX2阻遏蛋白结合区域-255和-529两个碱基发生改变,该突变改善了AOX1基因缺陷功能,有利于外源基因的高表达。
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