换一批
换一批CYP21和CYP21P基因启动子序列对绿色荧光蛋白基因表达的影响
Expression of Green Fluorescent Protein Vector by Promoter sequence of CYP21 Gene and CYP21P Gene
摘要特异性扩增CYP21基因和CYP21P基因启动子区域-770bp～-1bp片段,去除pEGFP-N1载体中的CMV启动子,构建含CYP21基因启动子的pEGFP-N1载体(pCYP21)和CYP21P基因启动子的pEGFP-N1载体(pCYP21P),分别将上述两种构建载体、野生型pEGFP-N1(阳性对照)质粒及阴性对照转染入肾上腺皮质来源的Y1细胞系中,用倒置荧光显微镜,以及激光共聚焦显微镜等方法观测绿色荧光蛋白的表达.转染后,在荧光倒置显微镜下首次发现Y1细胞中出现绿色荧光蛋白的时间阳性对照为3小时,pCYP21为7小时,pCYP21P与阴性对照(未转染任何载体的Y1细胞)始终未观测到绿色荧光蛋白.激光共聚焦显微镜显示,阳性对照绿色荧光蛋白表达强于pCYP21,pCYP21P与阴性对照始终未观测到绿色荧光蛋白.阳性对照和pCYP21的绿色荧光蛋白在胞核中的荧光强度高于胞浆.上述结果进一步表明,含有CYP21和CYP21P两种基因启动子的GFP质粒在Y1细胞中表达存在显著差异.
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