换一批摘要KyoT是一种LIM结构域蛋白,是以RBP-J为诱饵蛋白通过酵母双杂交系统得到的新分子.KyoT2可以抑制RBP-J介导的转录.以KyoT2为诱饵蛋白,通过酵母双杂交筛选得到了人类紧密连接蛋白2(ZO-2)的一种新的剪接体ZO-2-i3.序列分析表明,新的剪接体有19个外显子,与已发表序列比较,见ZO-2-i3分子的激酶后区发生了改变.为排除酵母双杂交实验的假阳性,实验首先在酵母中验证KyoT2与ZO-2-i3的体外直接相互作用并得到阳性结果.进而在大肠杆菌中原核表达纯化带有His标签的KyoT2蛋白,使用抗His标签的抗体,通过GST pull-down assay验证KyoT2与ZO-2-i3的体外直接相互作用,也获得阳性结果.并通过酵母实验初步确定了其作用位点,即KyoT2通过LIM2结构域与ZO-2-i3相互作用.本实验验证了KyoT2与ZO-2-i3的相互作用,并初步确定其相互作用位点,对探讨KyoT的功能具有重要意义.
更多相关知识
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（39970376）
- 浏览182
- 被引8
- 下载2
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
