利用多重筛选机制提高山羊乳腺上皮细胞基因打靶的效率

High-efficient Gene Targeting of Goat Mammary Epithelium Cell by the Multi-selection Mechanism

二维码有效期 120s

摘要构建了山羊β-酪蛋白基因座基因打靶载体pGBC-GFP-neo,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,以及无启动子的GFP基因.打靶载体线性化后用脂质体包裹转染山羊乳腺上皮细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,共得到抗性细胞克隆51个,对抗性克隆利用激素诱导β-酪蛋白基因启动子指导GFP表达,得到GFP表达阳性细胞克隆17个,对其中4个生长状态良好的克隆PCR检测验证后用于核移植,克隆胚发育率为59.5%,部分发育到桑椹胚或囊胚.

作者沈伟 ^[1] 闵令江 ^[2] 李兰 ^[3] 潘庆杰 ^[4] 吴晓洁 ^[5] 周艳荣 ^[5] 邓继先 ^[5] 学术成果认领

作者单位军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100 ^[1] 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100;山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200 ^[2] 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200 ^[3] 山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200 ^[4] 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 ^[5]

关键词山羊基因打靶乳腺生物反应器 β-酪蛋白基因

主题词山羊(Goats)基因打靶(Gene Targeting)基因(Genes)蛋白(Egg White)上皮细胞(Epithelial Cells)

分类号 Q813

栏目名称 动物遗传学

发布时间 2005-07-14

基金项目

国家高技术研究发展计划(863计划)