换一批摘要转座因子在生物体内广泛存在,它在研究基因的重组机理以及生物染色体的进化方面有着重要意义.IS10是细菌中的一种转座因子,它既能单独作为插入序列,也能作为Tn10的一部分进行转座.利用含sacB基因的质粒pXT3sacB,获得了由转座因子IS10插入而导致sacB基因失活的突变体.通过对插入突变体质粒DNA的序列测定(GenBank登记号为AY580883.1),结果表明IS10两端分别包括22 bp倒置重复区CTGAGAGATCCCCTCATAATTT和AAATCATTAGGGGATTCATCAG,这与前人的报道一致;而IS10两端的插入靶位点序列为TGCTTGGTT,该9 bp靶位点序列与前人报道的序列NGCTNAGCN不同.根据文献资料,本研究中的靶位点序列是首次报道.此外,通过Southern blot杂交分析,插入sacB基因中的IS10来源于宿主大肠杆菌DH5a染色体DNA,并且IS10在DH5α染色体中为两个拷贝.此外,本研究利用sacB基因捕获到转座因子IS10,该方法为研究其他插入序列提供了一个有益的体系.
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