毛白杨乙酰-乙酰载体蛋白硫脂酶基因(PtFATB)的克隆与表达分析
Cloning and Expression Analysis of PtFATB Gene Encoding the Acyl-acyl Carrier Protein Thioesterase in Populus tomentosa Carr.
摘要植物脂肪酸合成的主要部位是叶绿体,叶绿体向外运输脂肪酸的种类和数量受到乙酰-乙酰载体蛋白硫脂酶(FATB)控制.FATB基因在植物生长过程起着非常关键的作用.本研究以毛白杨为材料,将生物信息学知识和分子生物学手段相结合,首先利用现有的杨树基因组EST序列库资源,通过同源序列搜索,经过多次拼接合并获得了理论的杨树脂肪酸去饱和酶基因PtFATB序列全长,利用RT-PCR手段成功克隆得到了毛白杨FATB基因全长编码序列cDNA,该cDNA全长1,450 bp,包括起始密码子ATG和144 bp的5'末端非编码区,终止密码子TGA和40 bp的3'末端非编码区,开放阅读框编码421个氨基酸.通过RT-PCR半定量研究了PtFATB在叶片组织中的表达量最高,茎、根中的表达量依次降低.在低温、干旱、NaCl、ABA四种条件下诱导生长24 h,只有在低温的条件下发现PtFATB表达量略微降低,其他几种情况未有变化,该结果表明PtFATB呈组成型表达.上述结果为植物脂肪酸的基因工程提供了基础.
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