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Balb/c裸鼠LNCaP细胞前列腺癌原位移植模型的建立及超声造影在肿瘤血管生成中的作用

Establishment of LNCaP cell orthotopic transplantation model of prostate cancer in Balb/c nude mice and the role of contrast-enhanced ultrasound in tumor angiogenesis

摘要目的 构建Balb/c裸鼠LNCaP细胞前列腺癌原位移植模型并应用超声造影(CEUS)评价肿瘤血管生成的效果.方法 将LNCaP细胞接种到Balb/c裸鼠前列腺背叶中,构建Balb/c裸鼠LNCaP细胞前列腺癌原位移植模型;通过超声成像监测肿瘤的产生及体积变化情况,应用CEUS检查肿瘤内血流灌注情况并勾画感兴趣区域(ROI)生成时间强度曲线(TIC),通过仪器自动生成并记录造影剂进入肿瘤的到达时间(Atm)、到达峰值时间(TtoPk)、造影曲线下面积(AuC)等超声造影参数;通过病理学检查分析雄激素受体(AR)的表达,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中血小板内皮细胞粘附分子(CD31)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达,利用Image J软件对免疫组织化学结果进行分析并计算CD31与VEGF-A抗体染色的平均光密度值(AOD);最后应用Prism 9.0统计软件对CEUS参数Atm、TtoPk、AuC与AOD进行Pearson相关性分析.结果 肿瘤构建第50天,原位肿瘤成瘤率为71.43%(15/21),原位肿瘤平均体积为(288.81±76.49)mm3;通过超声造影曲线分析显示Atm为(1.59±0.65)s,TtoPk为(11.59±3.68)s,AuC为(1933.91±454.38)dB;解剖发现肿瘤呈椭圆形,肿瘤组织的免疫组织化学染色结果显示:肿瘤细胞中AR染色显示强阳性,AR定位于细胞核内;免疫组织化学染色发现CD31阳性、VEGF-A阳性,Image J软件分析显示CD31的AOD=0.39±0.06、VEGF-A的AOD=0.45±0.05,Prism统计分析显示VEGF-A与Atm、Ttopk、AuC之间相关性为r=-0.934(P<0.001)、r=-0.878(P<0.001)、r=0.868(P<0.001),CD31与Atm、Ttopk、AuC之间相关性为r=-0.678(P<0.001)、r=-0.360(P=0.018)、r=0.310(P=0.031).结论 本研究通过细胞悬液注射法成功建立了LNCaP细胞原位移植模型,CEUS可以有效地评价原位前列腺肿瘤中血管的生成情况.

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