换一批人源单重链噬菌体展示纳米文库的构建以及抗HER-2抗体的筛选
Construction of a human-derived single-heavy-chain phage display nanobody library and screening of anti-HER-2 antibodies
摘要目的 构建天然人源化单重链噬菌体展示纳米文库,筛选出特异性靶向人表皮生长因子受体-2(HER-2)的单重链抗体,作为后续嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞疗法的抗原靶向结构域.方法 分离志愿者的外周血,提取淋巴细胞中的总RNA,逆转录为cDNA,根据重链抗体保守区域骨架区FR设计引物,扩增出抗体的人抗体重链可变区(VH)片段,再利用噬菌体展示技术,重组到噬菌体中,建立天然的人单重链噬菌体纳米文库,筛选特异性靶向HER-2的噬菌体,应用ELISA和流式细胞术检测抗体亲和力和特异性.结果 成功构建了人源化单重链噬菌体纳米文库,总库容达到5× 1010且多样性较好,并成功筛选到高亲和力的抗HER-2单重链抗体.结论 本研究成功筛选到了抗HER-2的单重链抗体,并通过ELISA、流式等方法验证了其亲和力和特异性,为后续基于HER-2的抗体筛选与开发,以及临床肿瘤治疗奠定基础.
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关键词
噬菌体库人抗体重链可变区人表皮生长因子受体-2phage libraryhuman antibody heavy-chain variable regionhuman epidermal growth factor receptor-2
分类号
R392.9（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-5817.2025.03.014
发布时间
2025-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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