换一批过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞衰老及其机制探讨
Investigation of human retinal pigment epithelial cells senescence induced by hydrogen peroxide and its mechanisms
摘要目的 研究过氧化氢诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化损伤中的细胞衰老现象并探讨其机制.方法 培养的人RPE细胞随机分为正常对照组和过氧化氢处理组,过氧化氢处理组根据用600μmol · L-1过氧化氢处理的不同时段分为1h、6h、12 h、24h及72 h组.流式细胞术分析各组细胞周期,计算G0/G1期细胞所占比率；流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位的变化；免疫组织化学法检测各组细胞Caspase-9的变化.结果 与正常对照组相比,过氧化氢作用6h组G0/G1期细胞所占比率增高(P＜0.05),且随作用时间的延长而增加,72 h组最高(P＜0.01),达到(89.12±0.21)％；过氧化氢损伤导致RPE细胞膜电位降低,且随时间延长逐渐降低,72h组最低(62.48±0.59)；Caspase-9蛋白在过氧化氢作用1h时表达开始增高,且随时间延长逐渐增加,在24h时达到高峰(36.2±0.4),72 h时略有回落(26.4±0.8),但仍较正常组(3.2±0.2)高.结论 过氧化氢作用下,人RPE细胞生长停滞于G0/G1期,呈现衰老现象.线粒体膜电位的降低和线粒体凋亡途径上游因子Caspase-9的活化可能是细胞衰老的机制之一.
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