摘要目的 通过皮下注射氢溴酸东莨菪碱建立大鼠干眼模型,并对其眼表病理及角膜神经改变进行观察分析.方法 6周龄Wistar健康雌性大鼠32只,随机分为高(H)、中(M)、低(L)剂量组和对照(C)组,每组各8只,H、M、L组皮下注射东莨菪碱,剂量分别为6 mg·mL-1、4 mg·mL-1、2 mg·mL-1,C组皮下注射生理盐水.用药后0d、7d、14 d、21 d、28 d对各组大鼠行泪液分泌试验(Schirmer Ⅰ test,SIt)、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜上皮荧光素钠染色及泪液蕨类试验分析.用药后28 d时,处死大鼠取整个眼球,石蜡切片后行HE及PAS染色;其余眼取角膜行Real-time PCR及神经氯化金染色.结果 H组大鼠在用药后7d即出现BUT缩短为(6.800±1.033)s,与C组(9.111±1.269)s比较差异有显著统计学意义(P＜0.01),H组较L组缩短(P＜0.05).14 d时,H、M、L组的BUT分别为(5.200±0.632)s、(7.200±0.789)s和(9.000±0.816)s,短于C组(10.222±1.302)s,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);H、L、M组两两比较,差异均有显著统计学意义(均为P＜0.05).随着时间延长,H、M、L组的BUT进一步缩短.用药后21 d、28 d,除21 d时L组与C组、H组与M组差异无统计意义(均为P＞0.05)外,余组间差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01).用药后7d,H组、M组出现少量角膜上皮细点状荧光素钠着色,并随实验进程角膜上皮染色分级逐渐加重.用药后14 d,H组、M组的泪液分泌开始减少,分别为(5.200±0.978) mm、(6.350±1.528) mm,分别与C组(7.944±1.130)mm比较,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);21 d,各组的泪液分泌量略有增加;用药后28 d,H组、M组的泪液分泌量分别为(4.900±1.075) mm、(5.650±0.747) mm,较C组(7.600±1.600) mm显著减少(均为P＜0.01).而L组的泪液分泌量在各时点均较C组无明显减少(均为P＞0.05).泪液蕨类试验显示,H、M、L组泪液蕨类物结晶数量减少,分支减少,形态不完整,其中H组改变最明显.HE染色显示,H、M、L组角膜上皮增生,层数增加,角膜表面凹凸不平,基底细胞水肿、排列紊乱.其中,H组病变最明显,且可见空泡样变.用药后28 d,结膜杯状细胞除L组与C组差异无统计学意义外,余组间两两比较差异均有统计学意义(均为P＜0.05).角膜神经氯化金染色及Real-time PCR结果显示,各组的角膜神经纤维密度和走形及神经生长因子的表达水平均无显著变化.结论 皮下注射氢溴酸东莨菪碱可显著抑制大鼠泪液分泌,降低泪膜稳定性,引起眼表损伤,成功建立泪液缺乏为主的干眼模型,且干眼的进展呈时间和剂量依赖性,为进行干眼发病机制研究和干预治疗探索提供依据.