换一批
换一批晶状体主要内源性蛋白MIP的突变体致先天性白内障的发生机制
Mechanism of mutation of lens major intrinsic protein causing congenital cataract
摘要目的 研究晶状体主要内源性蛋白(major intrinsic protein,MIP) R233K突变体的产生是否影响MIP与钙调蛋白的相互作用,继而阐述此突变致先天性白内障的发病机制.方法 构建连有EGFP的MIP野生型及R233K突变体表达质粒,分别转染Hela细胞系,确定R233K突变体的亚细胞定位.用免疫共沉淀技术来检测R233K突变体与钙调蛋白的相互作用.合成野生型及突变型MIP羧基末端多肽链,用荧光素报告基因技术来验证这些多肽链的功能.结果 在EGFP的显影下,野生型及R233K突变体均定位于细胞膜上,p.R233K突变未影响MIP的亚细胞定位及其在细胞内的蛋白表达量.而免疫共沉淀实验显示,与野生型MIP相比,位于羧基末端的R233K突变体与钙调蛋白的相互作用明显减弱.荧光素报告基因实验证实,突变后的MIP与钙调蛋白的绑定亲和力明显下降.结论 R233K突变体影响了MIP与钙调蛋白的相互作用,降低了MIP羧基末端与钙调蛋白的绑定亲和力,继而影响了晶状体纤维细胞的水通透性,导致了先天性白内障的发生.
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栏目名称
实验研究
DOI
10.13389/j.cnki.rao.2015.0059
发布时间
2016-12-29
基金项目
National Natural Science Foundation of China
国家自然科学基金资助
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