MsrB1对ONOO-诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响
Effects of MsrB1 on peroxynitrite-induced cell cycle arrest in human lens epithelial cells
摘要目的 探讨蛋氨酸亚砜还原酶B1 (methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)基因沉默对过氧亚硝酸根(ONOO)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)细胞周期的影响和ERK信号通路在其中的调节作用.方法 将培养的HLEC分为两组:正常组和MsrB1基因沉默组,分别用0μmol·L-1、100 μmol·L-1、200μmol·L-1和300μmol·L-1ONOO-处理20 min后,继续培养12 h用RT-PCR法检测MsrB1基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Western blot法检测MsrB1基因沉默和ONOO对pERK表达水平的影响.结果 300 μmol·L-1ONOO-处理HLEC会导致MsrB1表达水平显著下降(P<0.01),当MsrB1基因沉默细胞经300 μmol·L-1ONOO-处理后,MsrB1表达水平进一步显著下调(P<0.05).经200μmol·L-1或300 μmol·L-1ONOO-处理,HLEC细胞周期分别阻滞在G2/M期和S期,当MsrB1基因沉默细胞经200μmol·L-1或300μmol·L-1ONOO-处理后,更多的细胞阻滞在G2/M期或S期(P<0.05) pERK检测结果表明,MsrB1基因沉默前后经ONOO处理导致的细胞周期阻滞和pERK表达水平显著下降有关(P<0.01).结论 ONOO可以下调HLECMsrB1表达水平,MsrB1基因沉默细胞经ONOO处理,pERK表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在G2/M期和S期.
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