H2O2对体外培养的视网膜色素上皮细胞活性、细胞周期、细胞中铁及铁调素浓度的影响
Effects of H2O2 on cell activity,cell cycle,iron and hepcidin levels of retinal pigment epithelial cells in vitro
摘要目的 观察H2O2对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞中铁及铁调素浓度的影响.方法 将人RPE细胞(ARPE-19细胞)分为正常对照组、75 μm·L-1 H2O2的氧化损伤组,培养0h、3h、6h、9h及12 h后,用MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期的变化、铁测试盒测定细胞内总铁浓度的变化、铁调素Elisa试剂盒测定铁调素的变化.结果 细胞活性分析发现H2O2可以抑制RPE细胞的增殖.氧化损伤组随着时间的延长,细胞的增殖活性明显下降.H2O2作用0h、3h、6h、9h、12 h细胞的凋亡率分别(4.83±1.20)%、(5.09±1.39)%、(5.89±1.87)%、(20.01±2.34)%、33.28±1.90%;H2O2作用3h细胞的凋亡率与0h比较差异无统计学意义(P>0.05),作用6h、9h及12 h与0h比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);H2O2作用3h,G1期细胞明显多于G2 +S期细胞,随着作用时间的延长,G1期细胞逐渐下降,至作用12 h后G2+S期细胞明显多于G1期细胞.H2O2作用0h、3h、6h、9h、12 h细胞内铁调素的浓度分别为(73.18±0.05) ng·mg-1、(57.83±4.99) ng·mg-1、(28.42±1.89) ng·mg-1、(18.13±0.21)ng·mg-1、(20.77±0.29)ng·mg-1,6h、9h、12 h与0h组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);H2O2作用0h、3h、6h、9h、12 h细胞内总铁浓度分别为(0.78±0.01)mg·g-1、(1.43±0.10)mgg-1、(0.78±0.02)mg·g-1、(0.52±0.03)mg·g-1、(0.57±0.02)mg·g-1,作用3h、9h、12h与0h比较差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 随着H2O2作用时间的延长,细胞凋亡率增加;细胞内总铁浓度先增加再降低;细胞内铁调素的浓度明显降低.H2O2可以通过打破细胞内铁的平衡起到氧化应激损伤作用.
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