人牙周膜干细胞、脐带间充质干细胞对体外培养角膜缘干细胞的影响
Effects of periodontal ligament stem cells and human umbilical cord mesenchymal stem cells on microenvironment of corneal limbal stem cells cultured in vitro
摘要目的 比较人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,HPDLSCs)、人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)作为饲养层培养角膜缘千细胞(limbal stem cells,LSCs)的优越性,从而筛选出扩增LSCs的最佳饲养层.方法 体外分离培养HPDLSCs、HUCMSCs,诱导细胞成脂、成骨分化,并检测细胞表面标志物的表达;将兔LSCs与HPDLSCs、HUCMSCs、NIH-3T3共培养和无饲养层单独培养,比较各组克隆形成率,免疫荧光比较各组LSCs克隆团ABCB5、IPO13、CK3/12的表达情况.结果 体外培养HPDLSCs、HUCMSCs均可向脂肪、成骨细胞分化,两种细胞均高表达间充质来源的表面标志CD90,不表达CD45;三组饲养层与兔LSCs共培养均可形成小克隆团,HPDLSCs组、HUCMSCs组、NIH-3T3组、无饲养层组克隆形成率分别为(4.90±0.96)%、(4.10±0.56)%、(4.67±0.76)%、(0.83±0.35)%,四组间总体比较差异有统计学意义(F =22.047,P=0.00);HPDLSCs组、HUCMSCs组与NIH-3T3组的克隆形成率差异均无统计学意义(均为P>0.05);HPDLSCs组、HUCMSCs组、NIH-3T3组与无饲养层组间差异均有统计学意义(均为P<0.01).免疫荧光化学检测三种饲养层LSCs标志物ABCB5、IPO13呈高表达,CK3/12呈低表达.结论 HPDLSCs、HUCMSCs均可作为替代饲养层用以培养LSCs.
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