摘要目的 探讨DNA修复基因MGMT在氧化损伤环境中对晶状体上皮细胞(LECs)中DNA的损伤修复能力以及凋亡影响.方法 采用不同浓度H2O2(0、200、400、600μmol·L-1)处理培养的晶状体上皮细胞(LECs),确认不同浓度H2O2对LECs的影响,将培养的 LECs 分为 Control 组(不做处理)、H2O2 组(加入400 μmol·L-1 H2O2)、H2O2+HA组[加入 400 μmol·L-1 H2O2 与对照质粒(HA)]及 H2O2+OE-MGMT 组[加入 400μmol·L-1 H2O2 与 5μL pcDNA3.1-MGMT(过表达质粒)及 12 μL Lipofectamine8000(脂质体转染试剂)].CCK-8实验检测各组细胞活力;Western blot实验检测年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体前囊膜组织(ARC组)及各组细胞蛋白(DNA损伤标志蛋白γH2A与促凋亡蛋白Bax/Bc12)表达水平;免疫荧光检测各组细胞DNA损伤修复能力(检测DNA损伤标志物15A3),TUNEL染色实验检测各组细胞凋亡情况.结果 Western blot实验检测结果显示,Control组与ARC组患者细胞中MGMT蛋白相对表达水平分别为1.000±0.002与0.597±0.001,差异有统计学意义(P＜0.0001).LECs的MGMT蛋白相对表达水平随H2O2浓度上升呈下降趋势.Control组、H2O2组、H2O2+HA组及H2O2+OE-MGMT组γH2A 相对表达水平分别为 1.000±0.005、1.424±0.011、1.359±0.009、0.586±0.004,Bax/Bc12 表达水平分别为 1.000±0.003、2.132±0.017、1.491±0.006、0.687±0.008,与H2O2+HA组比较,H2O2+OE-MGMT组表达均降低,差异均有统计学意义(均为P＜0.001).免疫荧光检测结果显示,Control组、H2O2组、H2O2+HA组及H2O2+OE-MGMT组 15A3 相对表达水平分别为 1.000±0.128、1.842±0.207、2.104±0.267、0.723±0.073,与 H2O2 组相比,H2O2+OE-MGMT组15A3染色荧光强度下降,差异有统计学意义(P＜0.001).TUNEL染色检测结果显示,Control组、H2O2组、H2O2+HA组及H2O2+OE-MGMT 组细胞凋亡的荧光强度分别为 1.800±0.002、13.660±0.002、18.000±0.011、2.150±0.003,与 H2O2 组相比,H2O2+OE-MGMT组细胞凋亡的染色荧光强度下降,差异有统计学意义(P＜0.0001).CCK-8检测结果显示,Control组、H2O2 组、H2O2+HA 组及 H2O2+OE-MGMT 组细胞活力分别为 100.09±1.54、57.09±2.09、60.39±3.87、74.16±1.96,与H2O2组比较,H2O2+OE-MGMT组细胞活力增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MGMT在ARC患者前囊膜组织以及H2O2诱导的LECs氧化损伤模型中的表达均下降.MGMT过表达参与双链断裂修复通路和碱基切除修复通路促进LECs内损伤性DNA的修复,从而增加细胞的活力和减少凋亡的发生,调控ARC的发生发展.