TTK基因在眼睑基底细胞癌中的表达及其对恶性肿瘤细胞生物学行为的影响
The expression of the threonine and tyrosine kinase gene in eyelid basal cell carcinoma and its impact on the biological behavior of malignant tumor cells
摘要目的 探索苏氨酸和酪氨酸激酶(TTK)基因与眼睑基底细胞癌(BCC)的相关性.方法 本研究基于GEO数据库,利用生物信息学方法筛选出与BCC肿瘤发生发展相关的核心基因TTK.收集资阳市中心医院手术切除的眼睑BCC组织标本(随着BCC恶性程度加重,将BCC细胞分为BCC Grade Ⅰ组、BCC Grade Ⅱ组及BCC Grade Ⅲ组)与眼睑良性肿瘤组织标本(设为Control组)进行后续实验比较.采用细胞免疫荧光法(CIA)检测TTK基因在眼睑良性肿瘤细胞和BCC细胞中的表达;慢病毒转染BCC细胞敲低TTK后[分别转染LV-TTK-shRNA(设为TTK-shRNA组)和阴性对照序列LV-BCC-shRNA(设为BCC阴性对照组)],采用CIA检测各组细胞中凋亡信号通路中关键蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达情况.结果 生物信息学方法筛选出与BCC肿瘤发生和发展相关的核心基因为TTK.CIA 检测结果显示,Control 组、BCC Grade Ⅰ 组、BCC Grade Ⅱ 组及 BCC Grade Ⅲ 组肿瘤细胞质中荧光强度分别为1.03±0.07、1.28±0.11、1.58±0.13及1.92±0.17,荧光强度逐渐增强,各组间细胞荧光强度比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).Control组、BCC阴性对照组及TTK-shRNA组细胞荧光强度分别为1.02±0.05、1.74±0.12及1.31±0.09.与Control组比较,BCC阴性对照组细胞荧光强度增强,TTK-shRNA组细胞荧光强度降低,三组间互相比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).Contro l组、BCC阴性对照组及TTK-shRNA组细胞中,抗凋亡蛋白BcL-2荧光强度分别为1.04±0.12、2.12±0.23 及 1.43±0.15;促凋亡蛋白 Bax 荧光强度分别为 1.02±0.08、0.64±0.11及1.47±0.16.TTK敲低后,BCC细胞中BcL-2表达水平降低,Bax表达水平升高,三组间BcL-2及Bax荧光强度组间互相比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 TTK基因参与了眼睑BCC细胞的增殖调控,并且这种作用与PI3 K-AKT-Bcl-2/Bax信号通路密切相关.
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