摘要目的 探讨RNA结合蛋白多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)通过铁死亡途径在干眼(DED)角膜上皮损伤中的作用机制.方法 构建高渗应激(94 mmol·L-1 NaCl)诱导的人角膜上皮细胞(HCECs)干眼模型.通过慢病毒短发夹RNA(shRNA)敲低PCBP1,对照为表达非靶向序列的阴性对照载体(shCtrl).实验分组:shCtrl组、shPCBP1 组、NaCl+shC-trl组以及NaCl+shPCBP1 组,NaCl浓度均为 94 mmol·L-1.CCK-8 实验检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;二氢乙锭荧光探针检测细胞活性氧(ROS)表达水平;Western blot检测细胞铁死亡相关蛋白[谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)、溶质载体家族 7 成员 11(SLC7A11)以及铁蛋白重链1(FTH1)]表达水平;铁测定试剂盒测定细胞内游离铁含量.结果 与shCtrl组相比,shPCBP1 组细胞PCBP1 表达水平、细胞凋亡率、细胞ROS阳性率以及细胞中游离铁表达水平均下降,NaCl+shCtrl组细胞PCBP1 表达水平、细胞凋亡率、细胞ROS阳性率以及细胞中游离铁表达水平均上升,细胞活性下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001).与NaCl+shPCBP1 组相比,shPCBP1 组细胞PCBP1 表达水平、细胞凋亡率、细胞ROS阳性率以及细胞中游离铁表达水平下降,NaCl+shCtrl组细胞PCBP1 表达水平、细胞凋亡率、细胞ROS阳性率以及细胞中游离铁表达水平上升,细胞活性下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001).与shCtrl组相比,shPCBP1 组细胞中FTH1、GPX4 以及SLC7A11 蛋白相对表达水平均上升,NaCl+shPCBP1 组细胞中FTH1 与SLC7A11 蛋白相对表达水平均上升,NaCl+shCtrl组细胞中FTH1、GPX4 以及SLC7A11 蛋白相对表达水平均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001).结论 PCBP1 是DED中铁死亡与氧化应激的关键调节因子,其通过抑制GPX4、SLC7A11 以及FTH1 蛋白的表达,增加铁死亡,促进DED的发生发展.