S100B时间分辨荧光免疫检测试剂盒的制备及性能评价

Preparation and performance evaluation of S100B time-resolved fluorescence immunoassay kit

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摘要目的:制备一种快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度的时间分辨荧光免疫检测试剂盒,并对其进行性能评价.方法:使用时间分辨荧光微球标记的抗S100B多克隆抗体及兔IgG抗体、标记垫、样品垫、S100B硝酸纤维素膜板、吸水纸制备试纸条,组装卡壳得到S100B时间分辨荧光免疫层析试剂盒.通过标准曲线、准确度、最低检测限、线性区间、特异度、重复性、稳定性等检测对该试剂盒进行性能评估.采用该试剂盒对某地区199例健康者血清及血浆样本的参考区间进行研究,并采用同步盲法测试该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的临床应用性能,评估2种试剂盒对于142例样本检测结果的一致性.结果:该试剂盒所得标准曲线方程为y=(1.133 02+1.752 24)/[1+(x/1.082 20)×(-0.603 52)]-1.752 24,R2=0.999 08,线性范围为[0.05,30]ng/mL.该试剂盒可满足准确度相对偏差在±15％内、最低检测限≤0.05 ng/mL、特异度相对偏差在±15％内、批内差和批间差的变异系数均＜15％的产品设计要求.稳定性检测结果标明该试剂盒可在2～30℃条件下有效保存12个月.同时,通过该试剂盒测得血清及血浆样本参考区间均＜0.3 ng/mL.临床验证结果表明该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的测定结果具有高度一致性(Kappa=0.906 1＞0.80),符合标准.结论:该试剂盒可快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度,为神经类疾病、自身免疫病性疾病、脑血管疾病等的诊断与治疗提供了参考.