α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选方法的构建及应用
Establishment and application of a screening method for α-glucosidase inhibitors
摘要为快速从天然产物中发现用于Ⅱ型糖尿病治疗的α-葡萄糖苷酶抑制先导化合物,本文建立并验证了一种基于紫外分光光度法的高效筛选平台.通过系统性优化,确定了最优条件为检测波长394 nm、200μL质量浓度为2 mg/mL的底物、100 μL酶活力为2 000 U/mL的酶、100 μL的PBS缓冲液、温度37 ℃、反应时间300 s.在此体系下,以阿卡波糖为阳性对照,对206种中药水提物进行活性筛查.结果显示,28种药材抑制率超过30%,其中桑白皮、蚕沙和蜜桑白皮的抑制率均超过60%,其IC50值与阿卡波糖相近.综上,所构建体系操作简便、灵敏可靠,不仅为α-葡萄糖苷酶抑制剂的快速筛选提供了实验依据,也为从中药中发掘新型抗糖尿病活性成分提供了可行途径.
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