换一批摘要目的：构建含变异链球菌表面蛋白SpaP的P区编码基因spap-P和葡聚糖结合蛋白GbpA的葡聚糖结合区编码基因gbd的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG,并观察其在哺乳动物细胞293T中的表达。方法：通过基因工程技术构建嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG,并采用脂质体转染法将其转染至293T细胞中；然后分别采用免疫组化SABC法和Western-blot检测嵌合蛋白SpaP/P-GBD在真核细胞中的表达。结果：重组真核表达质粒pVAX1-SPG经酶切、测序鉴定证实,其所携带的外源基因片段为2.4 kb的目的基因片段,序列同源性为99%；免疫组化染色结果显示,经pVAX1-SPG转染的293T细胞胞质呈棕褐色染色；Western-blot检测结果显示,分子量为72 kDa的嵌合蛋白SpaP/P-GBD能够被正确表达。结论：构建成功的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG能在真核细胞293T中正确表达目的蛋白。
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关键词
变异链球菌表面蛋白抗原葡聚糖结合蛋白哺乳动物细胞真核表达streptococcus mutanssurfaceprotein antigenglucan-binding proteinmammalian cellseukaryo-ticexpression
分类号
R780.2（口腔病理学）
栏目名称
DOI
10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2015.11.002
发布时间
2015-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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