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Wnt5a对牙髓干细胞成骨/成牙本质向分化的影响

Effect of Wnt5a on osteal/odontogenic differentiation of dental pulp stem cells

摘要目的:观察Wnt5a信号通路对牙髓干细胞(DPSCs)成骨/成牙本质向分化的影响.方法:利用慢病毒转染建立Wnt5a过表达和沉默的DPSCs细胞系,并对其进行成骨诱导;分别于成骨诱导1、2、3周时,采用qRT-PCR、Western blot法检测各组细胞中矿化相关标志物DMP1、DSPP、OCN、ALP mRNA和蛋白的表达水平,并通过茜素红染色及定量分析其矿化结节的形成情况.结果:Wnt5a过表达组细胞中的 DMP1、DSPP mRNA和蛋白在矿化诱导初即呈高表达,2周时达到最高,3周时表达明显降低;但其OCN、ALP mRNA和蛋白在矿化诱导初期则呈低表达,2周时表达量较高,3周时仍处于高表达状态;而在Wnt5a沉默组细胞中,上述4种矿化相关标志物mRNA和蛋白在各时间点均处于低表达状态.茜素红染色及定量分析结果显示:Wnt5a过表达后对DPSCs矿化的结节形成有明显促进作用,且与作用时间正相关;而Wnt5a沉默后,则对DPSCs矿化结节的形成有明显抑制作用.结论:Wnt5a过表达和沉默对DPSCs成骨/成牙本质向分化具有上调和抑制作用.

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