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骨形态发生蛋白-2单克隆抗体的制备及评价

Development and evaluation of BMP-2 monoclonal antibody

摘要目的:制备骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)单克隆抗体,并对其进行评价.方法:用重组人源BMP-2蛋白(rh BMP-2)对小鼠进行免疫;确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株;用间接竞争ELISA法筛选BMP-2阳性单克隆杂交瘤细胞;用常规Protein G进行纯化得到BMP-2单克隆抗体,并对其纯度、表位构相,特异性进行评价.结果:成功制备BMP-2单克隆抗体,其亚型为IgG2a,κ,纯化后的SDS-PAGE纯度大于90%.评价结果表明,本课题组研制的BMP-2抗体与rhBMP-2的结合位点为非线性表位,且特异性优于市售抗体,与BMP家族的BMP-4、BMP-5、BMP-7无交叉反应.结论:本课题组研制的单克隆抗体特异性好,效价高,可用于建立酶联免疫方法,检测骨修复材料中BMP-2含量.

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作者 刘启省 [1] 张东刚 [1] 南南 [1] 王金恒 [2] 陈亮 [3] 徐丽明 [3] 学术成果认领
作者单位 烟台正海生物科技股份有限公司,烟台,264000 [1] 北京三药科技开发公司,北京,100176 [2] 中国食品药品检定研究院,北京,102629 [3]
DOI 10.16155/j.0254-1793.2018.08.04
发布时间 2018-10-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
科技部重点研发计划(2016YFC1103203)
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药物分析杂志

药物分析杂志

2018年38卷8期

1310-1317页

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