换一批诱生型一氧化氮合酶FAD结合区的克隆、表达和活性鉴定
Cloning and Expression of Inducible Nitric Oxide Synthase FAD-Binding Domain and Its Binding Activity to FAD
摘要诱生型的一氧化氮合酶(iNOS)的表达可以被多种细胞因子、IPS、多种试剂及创伤等诱导,很多疾病的产生发展都与iNOS的过度表达有关.为进一步研究iNOS FAD结合区的功能和特异性抑制肽的筛选,用PCR方法克隆出iNOS FAD结合区编码基因片段(iNOS2031-2660bp),并在大肠杆菌中得到高效表达,得到表达率＞30%的包涵体;经过Ni金属螯合亲和柱层析和电泳纯化,得到纯度＞95%的重组蛋白,相对分子质量为23 000.运用波长扫描,证实纯化蛋白具有与FAD的结合活性,它可以作为筛选iNOS特异性抑制肽的靶蛋白.
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主题词
一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase)金属(Metals)蛋白(Egg White)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)细胞(Cells)
分类号
Q78
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-8915.2001.04.001
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（39670856）
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