换一批LHRH介导的TAT蛋白核心肽PTD的制备及转膜研究
Study on the Preparation and Transmembrane of TAT Protein Core Peptide PTD under LHRH Interference
摘要制备重组蛋白pET28a-LHRH-PTD-GFP, 利用绿色荧光蛋白GFP, 研究LHRH的介导和PTD蛋白的转膜作用.以重组质粒pET28a-PTD-GFP为模板, 设计含有LHRH基因序列的PCR引物, 经过PCR扩增后双酶切, 克隆到原核表达载体p ET28 (a) 中, 构建重组表达质粒pET28a-LHRH-PTD-GFP, 并在大肠杆菌中诱导表达, 纯化目的蛋白.通过GFP的荧光特性, 检测LHRH介导的PTD蛋白的转膜作用.成功构建LHRH-PTD-GFP原核表达载体, 融合蛋白相对分子质量约为30 k, 纯化得到蛋白浓度为1.62 mg/m L的LHRH-PTD-GFP重组蛋白.荧光显微镜检测结果显示, He La细胞内显现明显的绿色荧光, 证明LHRH介导的PTD蛋白具有很好的跨膜特性.该研究结果为下一步构建以LHRH为靶向, 以PTD为转膜作用的肿瘤治疗药物提供了理论基础和技术支撑.
更多相关知识
关键词
跨膜肽促黄体激素释放激素绿色荧光蛋白表达蛋白纯化靶向介导转膜Protein transduction domain (PTD)Luteinizing hormone releasing hormone (LHRH)Green fluorescence protein (GFP)ExpressionProtein purificationTargeted mediationTransfer function
分类号
Q7（分子生物学）
栏目名称
DOI
10.19526/j.cnki.1005-8915.20180201
发布时间
2018-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
科技部重大专项子课题（No.2016YFD0501002）
- 浏览18
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
