换一批
换一批摘要目的 探讨狂犬病毒采用鸡胚细胞在摇摆式反应器培养的工艺,为狂犬病毒的培养提供一种简便的新工艺.方法 2021年4月选取发育良好的9～11d鸡胚,在无菌环境下将其制备成原代鸡胚细胞后,将狂犬病毒CTNCEC25株和原代鸡胚细胞接种于一次性反应袋中,置于摇摆式反应器进行培养,通过对细胞密度(2.0×106、3.0×106、4.0×106和 5.0×106 个/ml)、感染复数(multiplicity of infection,MOI)(0.001、0.010、0.030、0.050、0.100)、溶氧(50％、70％、30％)、温度(32℃、33℃和34℃)等关键参数进行摸索,从而获得狂犬病毒最适的培养条件,并按照最适的培养条件培养3批病毒液验证该培养条件的稳定性.结果 狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器培养的最佳细胞密度为4.0×106～5.0× 106个/ml、MOI为0.010～0.100、培养48h后的溶氧为50％、48h后的培养温度为32～34℃,采用该条件培养获得的病毒收获液滴度均在8.01gFFU/ml以上,远高于中国药典规定的6.0lgFFU/ml.结论 通过本研究,建立了狂犬病毒CTNCEC25株在摇摆式反应器的培养工艺,为鸡胚细胞狂犬病疫苗产业化生产提供了参考.
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