过表达lncRNA H19、miR-675及低表达miR-4500对乳腺癌细胞增殖、侵袭的作用

Function of Overexpression of lncRNA H19,miR-675,and Lowerexpression miR-4500 in Promoting Breast Cancer Cell Proliferation and Invasion

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摘要目的:研究过表达lncRNA H19 和miR-675 及低表达miR-4500 通过调控上皮间质转化和自噬促进乳腺癌细胞增殖、侵袭的机制及临床意义.方法:体外培养的乳腺癌MCF-7 细胞分为过表达组、阴性对照组、空白组,每组设5 个复孔.构建lncRNA H19 过表达质粒,并以pc DNA3.1 空白载体作为阴性对照,通过Lipofectamine 2000 转染细胞,分别转染过表达组、阴性对照组的乳腺癌MCF-7 细胞,检测对比各组癌细胞的增殖及侵袭能力,各组lncRNA H19 和miR-675、miR-4500 的mRNA相对表达量,各组N-cadherin、Vimentin、OPN、Snail、Slug等EMT相关基因的mRNA相对表达量及蛋白表达水平,以及各组LC3、Beclin1 及mTOR蛋白表达水平.结果:过表达组的癌细胞增殖及侵袭能力较阴性对照组和空白组更强(P<0.05).过表达组lncRNA H19 和miR-675 的mRNA相对表达量较阴性对照组和空白组更高(P<0.05),miR-4500 的mRNA相对表达量较阴性对照组和空白组更低(P<0.05).过表达组N-cadherin、Vi-mentin、OPN、Snail及 Slug的mRNA相对表达量和蛋白表达水平较阴性对照组和空白组更高(P<0.05).过表达组LC3 及Beclin1 的蛋白表达水平较阴性对照组和空白组更低,mTOR的蛋白表达水平较阴性对照组和空白组更高(P<0.05).结论:过表达lncRNA H19 和miR-675 及低表达miR-4500 能够调控上皮间质转化和自噬作用,进而促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭,临床意义较大,值得关注.