换一批miR-29b靶向调控Sp1对血管内皮细胞生物学行为的影响
Effects of miR-29b Targeted Regulation of Sp1 On Biological Behaviors of Vascular Endothelial Cells
摘要目的:探讨miR-29b 对血管内皮细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡等生物学行为的影响.方法:选取人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为研究对象,将miR-29b进行转染,分为空白对照组、miR-29b mimics阴性对照组、miR-29b mimics组、miR-29b inhibitor阴性对照组、miR-29b inhibitor组,采用MTT法检测细胞增殖活力,Transwell 小室实验检测细胞迁移及侵袭能力,Hoechst 33342 荧光染色法检测细胞凋亡.通过生物信息学方法预测miR-29b与Sp1 的靶向结合位点,结合双荧光素酶报告基因检测和Sp1 蛋白表达结果验证二者的靶向关系.将Sp1 质粒与miR-29b mimics 共转染,采用上述相同的方法检测对HUVECs增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响.结果:与对照组相比,miR-29b过表达显著抑制HUVECs增殖、迁移和侵袭,且促进细胞凋亡,抑制miR-29b表达则呈现相反趋势的结果;靶标验证结果表明,Sp1 是miR-29b的靶基因;Sp1 的过表达能部分逆转miR-29b对HUVECs增殖、迁移、侵袭及凋亡的调控作用.结论:miR-29b通过靶向调控Sp1 的表达,影响HUVECs的增殖、迁移、侵袭及凋亡等生物学行为.
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