换一批2型猪链球菌SSU05_0736基因敲除株的构建及其特性分析
Construction and characterization of cAMP receptor protein knock-out mutant of Streptococcus suis serotype 2
摘要目的 2型猪链球菌是重要的人畜共患病病原菌,鉴定现有的和发掘新的毒力因子依然是该领域的研究热点.探讨SSU05_0736编码的cAMP受体蛋白在2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis2)中国强毒株05ZYH33中的作用机制,初步分析SSU05_0736基因敲除株的生物学特性,为进一步研究猪链球菌可能的毒力因子及其致病机制提供研究基础. 方法 利用同源重组原理构建并筛选由壮观霉素抗性基因(Spcr)替换S.suis2中SSU05_0736的基因敲除株△0736,系统比较分析野毒株与敲除株的生物学特性,同时将BALB/c小鼠作为动物感染模型来探究敲除株的毒力. 结果 通过组合PCR、反转录PCR(RT-PCR)等方法鉴定并成功构建基因敲除株△0736,其在菌落形态、溶血活性及对小鼠致病力等方面与野毒株无显著差异;两者生长速率相比,敲除株的生长较野毒株迟缓但其在对数期增长速率较大. 结论 SSU05_0736基因的缺失并未使猪链球菌2型强毒株05ZYH33的毒力发生显著改变,推测SSU05_0736基因并非毒力决定因子,但与野毒株相比敲除株在生长速率尤其对数期增长速率较大这一方面的改变,提示可对其代谢调控能力作进一步分析.
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DOI
10.16571/j.cnki.1008-8199.2016.06.003
发布时间
2016-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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