换一批苦参碱对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤的影响及作用机制
Effect and mechanism of matrine on apoptosis and oxidative damage of PC12 cells induced by Aβ25-35
摘要目的 分析苦参碱(MT)对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供依据.方法 取对数生长期的PC12细胞,分为对照组、Aβ25-35组(40μmol/L Aβ25-35)、MT低浓度(MT-L)组(40μmol/L Aβ25-35+2 mmol/L MT)、MT中浓度(MT-M)组(40μmol/L Aβ25-35+4 mmol/L MT)、MT高浓度(MT-H)组(40μmol/L Aβ25-35+8 mmol/L MT)、MT-H+Compound C组(40μmol/L Aβ25-35+2 mmol/L MT+10μmol/L Compound C);MTT法检测细胞活力;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测凋亡因子(Bax、Bcl-2 mRNA)的表达水平;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)通路相关蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平.结果 与对照组相比,Aβ25-35组细胞活力、Bcl-2 mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著降低,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著增加(P<0.05);与Aβ25-35组相比,MT-L组、MT-M组、MT-H组细胞活力、Bcl-2 mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著增加,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著降低,呈现剂量依赖性(P<0.05);与MT-H组相比,MT-H+Compound C组细胞活力、Bcl-2 mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著降低,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著增加(P<0.05).结论 MT抑制Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤,可能与激活AMPK/SIRT1通路有关.
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