换一批胃肠肿瘤类器官体外培养条件优化及应用研究
Optimization and application of in vitro culture conditions of gastrointestinal tumor organoids
摘要目的 优化肿瘤类器官培养条件,提高胃肠肿瘤类器官存活率及增殖能力,为胃肠肿瘤的应用研究提供优良体外模型.方法 胃癌肠癌类器官培养分为实验组和对照组,实验组培养基中分别添加具有抗氧化活性的中药提取物虎杖苷、柚皮苷和槲皮素,对照组培养基中不添加中药提取物.收集胃癌、肠癌患者标本,根据实验组和对照组,分别制备培养原代胃癌、肠癌类器官.酶标仪检测不同组别中类器官细胞存活率.复苏第 2 代胃癌和肠癌类器官,根据不同组别分别培养传代至第 4 代,测量并比较不同组别中类器官面积大小.EdU染色检测不同组别中类器官的增殖情况.HE染色观察胃肠肿瘤类器官的细胞间结构,免疫组化染色观察胃癌类器官中Ki67、CK7 和P53 表达,肠癌类器官中Ki67、CK20 和CDX2 表达.比较培养条件优化前后的胃癌、肠癌类器官的小分子靶向抗肿瘤药的药敏实验结果.分别对培养条件优化后的不同患者来源的胃癌、肠癌类器官进行小分子靶向抗肿瘤药的药敏实验.结果 培养条件中添加虎杖苷、柚皮苷,可以使原代胃肠肿瘤类器官呈现更高的细胞存活率(均P<0.01),传代至第 4 代,也保持了更大的类器官面积和更强的增殖活性(均P<0.05).培养条件中添加柚皮苷进行优化,HE染色观察到肿瘤类器官与亲本组织具有相似的结构,胃癌类器官中Ki67、CK7 和P53,肠癌类器官中Ki67、CK20 和CDX2 均同亲本组织具有相似的表达.培养条件优化前后的胃肠肿瘤类器官对小分子靶向抗肿瘤药物的反应具有较高的一致性.小分子靶向抗肿瘤药的药敏实验显示,不同患者来源的胃肠肿瘤类器官显示出不同的药物反应性.结论 优化体外培养条件后的胃肠肿瘤类器官模型稳定,可为胃肠肿瘤的应用研究提供优良的体外模型.
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10.16571/j.cnki.2097-2768.2025.09.005
发布时间
2025-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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