摘要目的 探讨浅低温通过miR-181a-5p改善肝缺血再灌注损伤(HIRI)的作用机制.方法 使用完全随机法将AML12 细胞(小鼠肝细胞系)分为空白对照组、氧糖剥夺/再灌注组(OGD/R组)、浅低温+OGD/R组(MIR组),将C57BL/6 小鼠随机数字表法分为假手术组(Sham组)、常温+HIRI组(IR组)、浅低温+HIRI组(MH+IR组),检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)水平、HE及TUNEL染色观察肝组织病理与凋亡细胞、试剂盒测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平、实时定量PCR检测miR-181a-5p及相关mRNA表达水平、Western blot检测相关蛋白、流式细胞术分析凋亡情况.另将AML12 细胞随机分为正常对照组(Contorl组)、浅低温+OGD/R组(MHT组)、转染空白质粒+MHT组(NC mimic组)、miR-181a-5p过表达+MHT组(miR-181a-5p mimic组),分析miR-181a-5p在HIRI中对细胞凋亡及相关蛋白的影响、双荧光素酶报告实验确定miR-181a-5p对RNA结合基序蛋白3(RBM3)的靶向调控作用.结果 细胞实验结果表明,与空白对照组相比,OGD/R组的miR-181a-5p、肝细胞凋亡水平明显升高(均 P<0.05),与 OGD/R组相比,MH+IR组 miR-181a-5p、Bax表达水平降低(均P<0.05),RBM3、Bcl2 表达升高(均P<0.05),AKT和mTOR相关蛋白磷酸化水平升高(均P<0.05),细胞凋亡减轻(P<0.05).动物实验结果表明,与Sham组相比,IR组的miR-181a-5p、ALT、AST水平、肝组织病理评分、MDA水平升高、SOD活性降低(均P<0.05),Bcl2 mRNA表达下降(P<0.05),Bax mRNA表达上升(P<0.05),与IR组相比,MIR组的上述各项损伤指标均得到显著缓解,并且RBM3 mRNA表达明显升高(P<0.05).细胞转染实验结果表明,与MHT组和NC mimic组相比,miR-181a-5p mimic组RBM3、Bcl2蛋白表达、AKT和mTOR相关蛋白磷酸化水平降低、Bax蛋白表达升高(均P<0.05),细胞凋亡水平升高(P<0.05),双荧光素酶报告实验表明,miR-181a-5p可以靶向RBM3(P<0.05).结论 浅低温预处理可以抑制肝miR-181a-5p的表达,靶向上调RBM3,激活AKT/mTOR通路,减少肝转氨酶释放,减轻细胞凋亡及氧化应激损伤,在HIRI中保护肝功能.