摘要目的 探讨靶向小鼠低氧诱导因子(HIF-1α)基因RNA干扰慢病毒载体(LV-HIF-1α-RNAi)对二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)介导的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响.方法 设计合成3对特异性针对小鼠HIF-1α基因的小干扰RNA(siRNA)序列,筛选出最高效的siRNA序列,构建LV-HIF-1α-RNAi.LV-HIF-1α-RNAi感染小鼠间充质干细胞,设慢病毒阴性对照组(LV-NC-RNAi),qPCR检测间充质干细胞HIF-1α mRNA表达水平以检测LV-HIF-1α-RNAi干扰效率.实验分为5组:单纯成骨分化组、DMOG+成骨分化组、LV-NC-RNAi+成骨分化组、LV-HIF-1α-RNAi+成骨分化组、LV-HIF-1α-RNAi+DMOG+成骨分化组.偶氮法进行碱性磷酸酶染色及钙结节Von-Kossa染色,比色法定量检测碱性磷酸酶及钙含量,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测RUNX2和OSX的mRNA及蛋白表达水平.结果 成功构建了高效LV-HIF-1α-RNAi,在体外BMSCs水平上,LV-HIF-1α-RNAi组HIF-1α mRNA相对表达水平明显低于LV-NC-RNAi组(P＜0.01).DMOG+成骨分化组及LV-HIF-1α-RNAi+DMOG+成骨分化组碱性磷酸酶及钙含量、RUNX2与OSX的mRNA与蛋白表达明显高于单纯成骨分化组、LV-NC-RNAi+成骨分化组、LV-HIF-1α-RNAi+成骨分化组(P＜0.01),DMOG+成骨分化组及LV-HIF-1α-RNAi+DMOG+成骨分化组间差异无统计学意义(P＞0.05),单纯成骨分化组、LV-NC-RNAi+成骨分化组、LV-HIF-1α-RNAi+成骨分化组间差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论 DMOG以HIF-1α非依赖方式介导间充质干细胞成骨分化调控.