柱前衍生化RP-HPLC测定铁皮石斛鲜品中的氨基酸的含量
Determination of Amino Acids in Dendrobium Officinale Fresh Product with Pre-column derivatization RP-HPLC
摘要目的 测定铁皮石斛鲜品中氨基酸的含量.方法 样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析.采用CAPCELL PAK C18 SG300(250mm ×4.6mm,5μm)色谱柱,柱温为25℃;流动相A为0.05mol/L醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH值至6.5)-乙腈(1∶1),流动相B为0.05mol/L醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH值至6.5),梯度洗脱,流速为0.6ml/min;检测波长为254nm.结果 15种氨基酸浓度在0.077 ~2.042 μg范围内呈良好的线性关系(r:0.9994~0.9999),平均回收率为94.3%~107.7%.结论 本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于铁皮石斛中氨基酸的检测.
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