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PCSK9介导ApoER2降解在血管平滑肌细胞多倍体化及衰老中的作用

Role of PCSK9 Mediating ApoER2 Degradation in Polyploidization and Senescence of Vascular Smooth Muscle Cells

摘要目的 观察 PCSK9 过表达对人血管平滑肌细胞多倍体化及衰老的影响,并探讨 ApoER2 在其过程中发挥的作用.方法 空载腺病毒(Ad-Null)和 PCSK9 过表达腺病毒(Ad-PCSK9)转染人血管平滑肌细胞,光镜观察细胞形态学改变;采用BrdU/PI染色,并采用 LSC法检测细胞的增殖及多倍体水平;采用 β-半乳糖苷酶检测试剂盒检测细胞衰老情况;采用 Western blot法检测PCSK9 和ApoER2 的表达水平.采用人重组ApoER2 蛋白(rhApoER2)干预Ad-PCSK9 转染的人血管平滑肌细胞,并检测其增殖及多倍体水平.结果 与 Ad-Null转染组比较,光镜下 Ad-PCSK9 转染组中多倍体血管平滑肌细胞的数目显著增加(P<0.01);LSC法检测结果显示,Ad-PCSK9 转染组的细胞多倍体水平显著上调并且增殖活性明显下降(P<0.01);β-半乳糖苷酶检测结果显示,PCSK9 转染组中 SAβG阳性细胞数目显著增加(P<0.01);Western blot法检测结果显示,ApoER2 的表达水平随 Ad-PCSK9 的过表达而显著下调(P<0.01).LSC法检测结果显示,rhApoER2 可以显著抑制 Ad-PCSK9 诱导的多倍体血管平滑肌细胞形成(P<0.05).结论 PCSK9 可通过介导人血管平滑肌细胞 ApoER2 的降解,促进血管平滑肌细胞多倍体的形成及衰老.

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