颅骨撞击构建小鼠视皮层TBI模型及视功能评估
Establishment of a Traumatic Brain Injury(TBI)Model in Mouse Visual Cortex via Skull Impact and Assessment of Visual Function
摘要目的 建立一种创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)的小鼠模型,以探讨视皮层损伤对视皮层神经生物学及认知功能的影响.方法 采用立体定位技术,对8周龄C57BL/6小鼠的初级视皮层(primary visual cortex,V1)上方颅骨进行局部不同强度撞击(撞击速度1~4m/s),同时避免造成硬脑膜破损.撞击2周后,通过免疫荧光染色及共聚焦显微成像分析神经元数量变化,利用相似物体识别和2h新物体识别实验评估模型小鼠视觉功能,利用旷场实验和24h新物体识别实验评估模型小鼠运动、焦虑和认知等功能.结果 当撞击速度为4m/s时,小鼠V1浅层神经元数量降低约10%(P<0.01),与轻微脑损伤患者相当.在相似物体识别实验中,TBI模型小鼠的辨别指数(recognition index,RI)相比对照组显著降低(0.51±0.06 vs 0.58±0.05,P<0.05);在2h新物体识别实验中,TBI模型小鼠的RI与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);在旷场实验中,TBI模型小鼠的运动速度、中央区停留时间相比对照组差异无统计学意义(P>0.05);在24h新物体识别实验中,TBI模型小鼠的RI与对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 以物理撞击方式(速度4m/s、深度0.5mm、停留时间0.5s)建立V1浅层损伤的小鼠模型,其视觉功能受到轻微损伤,并且不影响其运动及记忆功能,为研究TBI后视觉障碍的恢复机制提供了新的研究工具.
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