换一批
换一批人颗粒裂解肽突变子在大肠埃希菌中的构建与表达研究
Construction and expression of a fusion gene expression vector containing human NKG5-Ser
摘要目的 构建NKG5突变基因的原核表达载体并进行表达研究.方法 采用寡核苷酸合成的方法,拼接成为NKG5-Ser的编码序列,克隆到pGEMT载体上,测序正确后,再切下编码序列连接到质粒pGEX-4T-1中,重组表达载体转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导使融合蛋白高效表达.结果 成功获得重组表达载体pGEX-4T-1-NKG5-Ser,转染大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹反应均显示显示出相对分子量(Mr)为35 kD的蛋白条带,证明融合蛋白表达成功.结论 获得了突变NKG5与GST的融合蛋白,为进一步的工作打下了基础.
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