淫羊藿苷对高重力下成骨细胞MC3T3-E1增殖与凋亡的影响
Effects of icariin on proliferation and apoptosis of osteoblasts MC3T3-E1 cells under hypergravity
摘要目的 体外模拟成骨细胞在体内的生存环境,探讨淫羊藿苷(ICA)对高重力下成骨细胞MC3T3-E1增殖与凋亡的影响.方法 将成骨细胞随机分为三组:高重力组、高重力+ICA组(以下简称“联合组”)和对照组,其中,高重力组予以20G高重力,联合组将20G高重力和10 μg/L ICA同时应用于细胞,对照组正常培养,不进行任何附加操作.采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞凋亡相关基因,透射电镜(TEM)检测细胞亚细胞结构变化.结果 MTT法检测显示,高重力组吸光度值显著低于对照组(P<0.01),联合组吸光度值显著高于对照组和高重力组(P< 0.01).FCM检测显示,高重力组凋亡率显著高于对照组(P<0.01),联合组凋亡率显著低于对照组和高重力组(P<0.01).qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,高重力组Bax、Bc12、Bax/Bc12、P53的mRNA表达均显著上调(P< 0.01或P<0.05),联合组除Bax/Bc12 mRNA表达外均显著下调(P< 0.05或P<0.01),且联合组Bax、Bc12、Bax/Bc12、P53的mRNA表达均显著低于高重力组(均P< 0.01).TEM下可见高重力组呈中晚期凋亡和变性坏死现象,而其他两组无明显变化.结论 成骨细胞可响应高重力刺激信号并发生一系列变化;高重力(20G)不仅可抑制成骨细胞增殖,促进细胞凋亡,还可导致成骨细胞发生变性坏死,但适当浓度(10 μg/L)的ICA可逆转高重力加载所导致的这种不利影响,对成骨细胞起相应的保护作用.
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