下调人质膜型唾液酸酶对前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制
Influence of down regulation of Neu3's to PC-3 cell's proliferation, invasiveness, and its mechanism
摘要目的 探讨人质膜型唾液酸酶(Neu3)表达降低对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.方法 构建pGCsi-Neu3质粒,从GeneBank中寻找符合Neu3 mRNA特异的靶序列,合成siRNA模板链后与载体相连接,转入感受态细胞,测序鉴定.应用真核细胞转染技术转染前列腺癌PC-3细胞,利用荧光显微镜检测转染效率;细胞增殖实验检测pGCsi-Neu3质粒对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的改变;Transwell迁移、侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力的变化.结果 针对Neu3基因设计了siRNA序列并成功构建pGCsi-Neu3质粒,pGCsi-Neu3-3质粒对基因Neu3的抑制最为有效.与对照组比较,pGCsi-Neu3-3质粒可有效抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01);pGCsi-Neu3-3质粒可引起前列腺癌PC-3细胞凋亡,凋亡率明显高于空白对照组(MOCK组),差异有统计学意义(P<0.05);pGCsi-Neu3-3质粒可使前列腺癌PC-3细胞增殖细胞核抗原表达明显下降;pGCsi-Neu3-3质粒可抑制前列腺癌PC-3细胞迁移、侵袭能力,且与对照组比较,差异有高度统计学意义(P<0.01).结论 针对Neu3基因siRNA表达质粒的构建、鉴定和初始研究,为Neu3对前列腺癌细胞生长、转移发挥作用机制的研究奠定实验基础.
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