换一批前列腺六段跨膜上皮抗原4对炎症环境下前列腺癌细胞增殖的影响
Effect of six-segment transmembrane epithelial antigen of prostate 4 on proliferation of prostate cancer cells in inflammatory environment
摘要目的 探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症微环境下前列腺六段跨膜上皮抗原 4(STEAP4)在前列腺癌发展中的作用.方法 采用LPS诱导前列腺癌细胞PC3和VCaP的炎症环境;将PC3 和VCaP细胞分为对照组、LPS处理组(将 PC3 和VCaP细胞暴露于 1 μg/ml的 LPS)、转染对照组(LPS+转染si-con)和转染沉默组(LPS+转染si-STEAP4).转染 24h后采用蛋白免疫印迹检测STEAP4水平.采用酶联免疫吸附试验检测细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平.采用CCK-8和EdU染色检测细胞增殖能力.采用蛋白免疫印迹检测环鸟苷酸(cGMP)-cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)信号通路相关蛋白表达水平.结果 LPS处理组PC3 和VCaP细胞的STEAP4 蛋白表达水平显著高于对照组(P＜0.05);LPS处理组PC3 和VCaP细胞的STEAP4蛋白表达水平与转染对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);转染沉默组PC3 和VCaP细胞的STEAP4 蛋白表达水平显著低于转染对照组(P＜0.05).LPS处理组PC3 和VCaP细胞的IL-6、IL-8 和TNF-α的表达水平显著高于对照组(P＜0.05);LPS处理组和转染对照组PC3 和VCaP细胞的IL-6、IL-8 和TNF-α的表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);转染沉默组PC3 和VCaP细胞的IL-6、IL-8 和TNF-α的表达水平显著低于转染对照组(P＜0.05).LPS处理组PC3和VCaP细胞 24、48、72 h的增殖活力均显著高于对照组(P＜0.05);LPS处理组和转染对照组PC3 和VCaP细胞 24、48、72 h的增殖活力比较,差异无统计学意义(P＞0.05);转染沉默组PC3和VCaP细胞 24、48、72 h的增殖活力均低于转染对照组(P＜0.05).LPS处理组PC3和VCaP细胞的增殖活力显著高于对照组(P＜0.05);LPS处理组和转染对照组PC3 和VCaP细胞的增殖活力比较,差异无统计学意义(P＞0.05);转染沉默组PC3 和VCaP细胞的增殖活力显著低于转染对照组(P＜0.05).LPS处理组PC3 和VCaP细胞中cGMP、PKG1、PKG2 和磷酸化血管扩张剂刺激磷酸蛋白(pVASP)/VASP的相对表达量显著低于对照组(P＜0.05);转染对照组和LPS处理组PC3 和VCaP细胞中cGMP、PKG1、PKG2 和pVASP/VASP的相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05);转染沉默组的PC3 和VCaP细胞中cGMP、PKG1、PKG2 和pVASP/VASP的相对表达量显著高于转染对照组(P＜0.05).结论 STEAP4 沉默能够抑制LPS诱导的前列腺癌细胞的增殖和炎症反应.STEAP4下调可能通过减少细胞增殖和炎症反应来抑制LPS诱导的肿瘤发生.
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