HPLC-MS/MS法同时测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦、拉莫三嗪浓度及其临床应用

Simultaneous determination of Methotrexate,Levetiracetam,and Lamot-rigine in small volume of plasma by HPLC-MS/MS and its clinical applica-tion

二维码有效期 120s

摘要目的建立HPLC-MS/MS法测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦和拉莫三嗪的浓度,同时应用于儿童治疗药物监测.方法取含药血浆 10 μl,用蛋白沉淀法对样本进行前处理.色谱柱为Agilent C18(50 mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相为 0.1%甲酸水和甲醇,梯度洗脱;流速为 0.4 ml/min.采用电喷雾离子源正离子模式,监测甲氨蝶呤m/z 455.1→308.2,甲氨蝶呤-D3 m/z 458.1→311.1(内标);左乙拉西坦m/z 171.1.4→126.2,左乙拉西坦-D6 m/z 177.2→132.2(内标);拉莫三嗪m/z 256.1→211,拉莫三嗪-13C3-D3 m/z 262.1→217.1(内标).结果甲氨蝶呤在 25～1 500 ng/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=0.251 6X+0.003 4(r=0.998 9),定量下限为 25 ng/ml;左乙拉西坦在1～50 μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=16.687 6X+0.000 2(r=0.991 1),定量下限为 1 μg/ml;拉莫三嗪在0.5～25.0 μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=46.3695X-0.0599(r=0.9991),定量下限为 0.5 μg/ml.样本批内、批间准确度和精密度符合要求、基质效应符合规定.本方法验证后成功用于 1 348 例临床患儿样本的检测.结论本方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于人血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦及拉莫三嗪的分析,适用于儿童治疗药物监测.