换一批基于密码子优化及分泌信号肽引导的HBcVLP真核表达系统构建
Construction of a eukaryotic expression system for HBc VLP based on codon optimization and secretory signal peptide guidance
摘要目的 开发一种融合密码子优化与分泌信号肽技术的乙型肝炎病毒核心抗原病毒样颗粒(HBc VLP)真核高效分泌表达系统,解决传统表达系统的弊端,为相关生物制品的研发奠定基础.方法 本研究依据HEK293细胞密码子偏好性对HBc基因进行优化,将其密码子适应指数值提升至0.930.随后构建含有κ轻链分泌信号肽的重组载体pSecTag2A-HBc-VLP-His,并将其转染至HEK293细胞.转染后,通过镍柱层析对分泌蛋白进行纯化,利用Western blot法检测纯化蛋白的表达情况,同时运用动态光散射及透射电镜验证HBc VLP的特性.结果 Westernblot实验结果表明,23kD的目标蛋白实现了高效分泌表达.粒度仪检测显示HBc VLP纳米颗粒的平均粒径为28.2 nm,透射电镜观察到其形成粒径约为30 nm的球形微粒,在形态上与天然的乙型肝炎病毒微粒相似,具备良好的HBc VLP特征.结论 本研究成功建立的表达系统兼具高效率与低污染的显著特性,不仅克服了传统表达系统的不足,还为疫苗的高效生产及纳米载体的开发提供了全新的策略与技术支持,有望推动相关生物医学领域的进一步发展.
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关键词
乙型肝炎病毒核心抗原病毒样颗粒密码子优化真核表达分泌蛋白Hepatitis B core antigen virus-like particlesCodon optimizationEukaryotic expressionSecretory protein
分类号
R392-33（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.20047/j.issn1673-7210.2025.15.02
发布时间
2025-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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