基于Hippo通路效应分子探讨芹菜素抗类风湿关节炎的作用及可能机制
Discussion on the anti-rheumatoid arthritis effect and possible mechanism of apigenin based on the Hippo pathway effector molecules
摘要目的 探讨芹菜素(Api)通过调控Hippo通路效应分子发挥抗类风湿关节炎(RA)的作用及可能机制.方法 实验分为正常成纤维样滑膜细胞组(对照组)、RA成纤维样滑膜细胞组(模型组)、RA成纤维样滑膜细胞加用不同浓度Api处理[低浓度Api组(20 μmol/L)、中浓度Api组(30 μmol/L)、高浓度Api组(40 μmol/L)],通过EdU检测和Transwell实验评估不同浓度Api对其增殖与迁移的影响.通过Western blot法验证对照组、模型组、RA-FLS+Api(30 μmol/L)(Api处理组)中Api对RA-FLS中YAP蛋白表达的影响;构建YAP过表达细胞模型:分为RA-FLS+AdC 组(过表达对照组)、RA-FLS+AdYAP 组(YAP 过表达组)、RA-FLS+AdYAP+Api(30 μmol/L)(过表达Api处理组),通过Western blot法及Transwell实验证实Api通过影响YAP的表达调控RA-FLS的迁移.结果 模型组EdU阳性细胞数高于对照组(P<0.05).低浓度Api组的EdU阳性细胞数与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),中、高浓度Api组低于模型组(P<0.05).与对照组比较,模型组的细胞迁移能力增强(P<0.05),低浓度Api组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),中、高浓度Api组低于模型组(P<0.05).与对照组比较,模型组YAP蛋白表达水平增加(P<0.05);与模型组比较,Api处理组YAP蛋白表达水平降低(P<0.05).与过表达对照组比较,YAP过表达组YAP蛋白表达水平增加(P<0.05);与YAP过表达组比较,过表达Api处理组YAP蛋白表达水平降低(P<0.05).与过表达对照组比较,YAP过表达组RA-FLS迁移能力增强(P<0.05);与YAP过表达组比较,过表达Api处理组细胞的迁移能力下降(P<0.05).结论 Api通过下调YAP蛋白的表达,抑制RA-FLS的迁移,从而延缓RA的疾病进程,可成为临床治疗RA的新型药物.
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