摘要目的 探讨miR-520c-3p通过调控PI3K/Akt信号通路抑制脊髓神经元细胞凋亡的分子机制.方法 本研究以SD新生鼠脊髓原代神经元(SCN)细胞为模型,构建H2O2诱导的氧化损伤细胞模型,将SCN细胞分为正常组(正常培养)、H2O2组(添加H2O2处理)、miR-NC组(转染阴性对照siRNA后,添加H2O2处理)、miR-520c-3p组(转染miR-520c-3p mimics后,添加H2O2处理)、LY294002组(PI3K抑制剂预处理后,添加H2O2处理)、miR-520c-3p+LY294002组(联合转染miR-520c-3p mimics与PI3K抑制剂预处理后,添加H2O2处理).通过流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法分析PI3K/Akt通路关键蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt)表达水平,RT-qPCR检测凋亡相关基因(Bel-2、FasL、Caspase-9)及miR-520c-3p的表达,双荧光素酶报告实验验证靶点.结果 与正常组比较,H2O2组细胞凋亡率升高,其PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA表达量降低,Caspase-9、FasL的mRNA表达量升高(P＜0.05);与H2O2组比较,miR-520c-3p组、LY294002组细胞凋亡率降低,PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平降低(P＜0.05),同时miR-520c-3p组细胞中的miR-520c-3p、Bcl-2 mRNA 表达量升高,Caspase-9、FasL mRNA 表达量降低(P＜0.05),LY294002 组 Bcl-2 mRNA 表达量升高,Caspase-9、FasL mRNA 表达量降低(P＜0.05);与 miR-520c-3p 组比较,miR-520c-3p+LY294002 组细胞凋亡率降低,PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt 蛋白表达水平降低,Bcl-2、miR-520c-3p mRNA 表达量升高,Caspase-9、FasL mRNA表达量降低(P＜0.05);与 LY294002 组比较,miR-520c-3p+LY294002 组细胞凋亡率下降(P＜0.05);miR-520c-3p+LY294002 组 p-PI3K、Akt、p-Akt mRNA 表达量下降(P＜0.05),miR-520c-3p 组 mRNA 表达量升高(P＜0.05).双荧光素酶实验发现,与pPGK-NC+NC组比较,PIK3CA-WT+miR-520c-3p组共转双荧光素酶活性比值显著下调(P＜0.01).结论 miR-520c-3p通过靶向PIK3CA抑制PI3K/Akt通路,下调促凋亡因子、上调抗凋亡因子,协同LY294002减轻神经元细胞凋亡,为脊髓损伤治疗提供新靶点.