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活血散中6种透皮药物成分对软组织损伤修复中成纤维细胞的影响

Effect of six transdermal drug components in Huoxuesan on fibroblasts in soft tissue injury repair

摘要目的 研究活血散中6种透皮药物成分对软组织损伤修复的作用.方法 通过划痕法和D-半乳糖法建立人成纤维细胞(HFF-1)体外损伤模型,CCK8法检测活血散中的6种药物透皮成分对细胞增殖活性的影响.配置6种药物单体溶液,分别处理造模后细胞,Western blot法测量血管内皮生长因子(VEGF)、表皮细胞生长因子(EGF)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验法测定羟脯氨酸、Ⅰ型胶原酶、Ⅲ型胶原酶、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、前列腺素E2(PGE2)含量.结果 CCK8实验确定了后续实验安全浓度:40 μmol/L香豆素、80 μmol/L葫芦巴碱、160 μmol/L齐墩果酸、40 μmol/L小檗碱、160 μmol/L肤子皂苷、40 μmol/L芦丁.实验发现,划痕造模组、D-半乳糖造模组VEGF和EGF蛋白表达水平高于空白对照组(P<0.05).与划痕造模组、D-半乳糖造模组比较,葫芦巴碱组、齐墩果酸组、小檗碱组VEGF与EGF蛋白表达水平降低(P<0.05).划痕造模组、D-半乳糖造模组羟脯氨酸、Ⅰ型胶原酶、Ⅲ型胶原酶表达量高于空白对照组(P<0.05).与划痕造模组比较,齐墩果酸组、小檗碱组、地肤子皂苷组、芦丁组中羟脯氨酸表达量降低,香豆素组、齐墩果酸组、小檗碱组Ⅰ型胶原酶表达量降低,小檗碱组、芦丁组Ⅲ型胶原酶表达量降低(P<0.05).与D-半乳糖造模组比较,芦丁组Ⅲ型胶原酶表达水平降低(P<0.05).划痕造模组、D-半乳糖造模组IL-1β、IL-6、PGE2表达量高于空白对照组(P<0.05).与划痕造模组比较,芦丁组中IL-1β的表达量降低,小檗碱组、地肤子皂苷组、芦丁组中IL-6表达量降低,小檗碱组、芦丁组中PGE2表达量降低(P<0.05).与D-半乳糖造模组比较,小檗碱组、地肤子皂苷组、芦丁组中IL-6和PGE2表达量降低(P<0.05).结论 活血散中的6种药物透皮成分能够从减轻局部组织肿胀、改善病理状态、抑制局部炎症等多途径缓解急性损伤症状,加快恢复速度,是活血散治疗急性闭合性软组织损伤的效应物质.

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