摘要目的 探讨DDIT4在前列腺癌多西紫杉醇(Doc)耐药中的作用与机制.方法 通过浓度递增的Doc持续刺激方法构建耐药细胞株C42-DR和PC3-DR;通过RNA-seq分析差异基因,RT-qPCR和Western blot法分别检测mRNA和蛋白表达;通过获取TCGA数据库和GEO数据库数据分析DDIT4表达与患者预后的关系;采用小干扰RNA转染降低基因表达,分为si-NC组、si-DDIT4组,CCK8实验评估DDIT4沉默对耐药细胞Doc IC50的影响;分为si-NC+溶媒组、si-DDIT4+溶媒组、si-NC+Doc组和si-DDIT4+Doc组,克隆形成实验评估DDIT4沉默对Doc耐药的影响;基因富集分析前列腺癌中评估DDIT4与自噬通路的相关性;Western blot法检测自噬相关蛋白表达;mRFP-GFP-LC3慢病毒示踪实验检测自噬流水平.结果 RNA-seq结果显示,与C42和PC3细胞比较,DDIT4在C42-DR和PC3-DR细胞中升高;Western blot结果显示,C42-DR和PC3-DR细胞中DDIT4蛋白表达水平高于C42和PC3细胞(P＜0.05);在线数据库数据生存分析显示,DDIT4高表达组患者无生化复发生存期均短于低表达组患者(HR=2.139、5.636,P＜0.05).与 si-NC 组比较,C42-DR 和 PC3-DR 细胞 si-DDIT4组 Doc 的 IC50明显降低.克隆形成实验显示,si-DDIT4+Doc组细胞克隆形成能力低于si-NC+Doc组(P＜0.05).基因富集分析确定了前列腺癌中DDIT4高表达与自噬激活相关.与C42和PC3细胞比较,C42-DR和PC3-DR细胞中LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,p62蛋白表达降低(P＜0.05),PC3-DR si-DDIT4+Doc组中LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和p62蛋白的表达水平低于si-NC+Doc 组(P＜0.05);且si-DDIT4+Doc组细胞内自噬流水平显著降低.结论 DDIT4可能通过促进细胞自噬,介导前列腺癌对多西紫杉醇的耐药性.