miR-145调控TLR4/MyD88信号通路改善宫颈癌紫杉醇耐药的分子机制研究
Study on the molecular mechanism of miR-145 regulating the TLR4/MYD88 signaling pathway to improve Paclitaxel resistance in cervical cancer
摘要目的 探究miR-145通过调控TLR4/MyD88信号通路影响宫颈癌紫杉醇(PTX)耐药的作用机制.方法 体外培养HeLa细胞及其PTX耐药株(HeLa/PTX),采用MTT法检测细胞对PTX的半数抑制浓度(IC50).将HeLa/PTX细胞分为miR-145抑制剂对照组、miR-145抑制剂组、miR-145模拟物对照组和miR-145模拟物组,转染后,检测细胞增殖活力并计算HeLa/PTX细胞对PTX的1C50值;RT-qPCR法检测TLR4和MyD88基因表达;Western blot法检测TLR4/MyD88及下游信号通路蛋白表达.结果 HeLa/PTX细胞对PTX的IC5.值高于HeLa细胞;miR-145 抑制剂组HeLa/PTX细胞对PTX的IC5.值高于miR-145抑制剂对照组;miR-145模拟物组HeLa/PTX细胞对PTX的IC5.值低于miR-145模拟物对照组.与miR-145抑制剂对照组比较,miR-145抑制剂组TLR4和MyD88 mRNA表达及TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p65、TNF-α、IL-1β蛋白表达升高(P<0.01);与模拟物对照组比较,miR-145 模拟物组 TLR4、MyD88 mRNA 表达及 TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p65、TNF-α、IL-1β 蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01).结论 miR-145可能通过下调TLR4、MyD88表达,抑制NF-κB信号通路转导,从而抑制HeLa/PTX细胞的炎症反应,增强HeLa/PTX细胞对PTX的敏感性.
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